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RNA-seq實(shí)驗(yàn)
更新時(shí)間:2024-07-26
訪問(wèn)量:1167
廠商性質(zhì):其他
原理及過(guò)程:
轉(zhuǎn)錄組是某個(gè)物種或者特定細(xì)胞類型產(chǎn)生的所有轉(zhuǎn)錄本的集合。轉(zhuǎn)錄組研究能夠從整體水平研究基因功能以及基因結(jié)構(gòu),揭示特定生物學(xué)過(guò)程以及**發(fā)生過(guò)程中的分子機(jī)理。
先將樣品提取總RNA,在這之后,除去rRNA(對(duì)于真核生物,用帶有Oligo(dT)的磁珠富集mRNA,對(duì)于原核生物,用試劑盒去除rRNA),向得到的mRNA中加入Fragmentation Buffer使其片斷成為短片段,再以片斷后的mRNA為模板,用六堿基隨機(jī)引物(random hexamers)合成cDNA**鏈,并加入緩沖液、dNTPs、RNase H 和DNA polymerase I 合成cDNA第二鏈,經(jīng)過(guò)QiaQuick PCR試劑盒純化并加 EB緩沖液洗脫經(jīng)末端修復(fù)、加堿基A,加測(cè)序接頭,再經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳回收目的大小片段,并進(jìn)行PCR擴(kuò)增,從而完成整個(gè)文庫(kù)制備工作,構(gòu)建好的文庫(kù)用Illumina HiSeq2000進(jìn)行測(cè)序。
伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗(yàn),具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細(xì)胞、分子、病理等實(shí)驗(yàn)平臺(tái)近1000平方米,擁有的儀器設(shè)備、細(xì)胞庫(kù)、樣本保存庫(kù)等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心近1800平方米,可滿足同時(shí)飼養(yǎng)清潔級(jí)和SPF級(jí)動(dòng)物。核心實(shí)驗(yàn)技術(shù)團(tuán)隊(duì)主要來(lái)自大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)等重點(diǎn)高校及科研機(jī)構(gòu),能夠?yàn)榭蛻籼峁┭芯糠桨覆邉潯㈨?xiàng)目實(shí)施及項(xiàng)目深度分析等方面的技術(shù)支持。公司目前參與研究項(xiàng)目已經(jīng)涵蓋心腦血管、腫瘤、內(nèi)分泌、生殖、免疫、神經(jīng)等諸多領(lǐng)域。